氣相色譜儀基礎知識 (一)概要什么是氣相色譜儀以氣體為流動相(稱載氣)的色譜分析法稱氣相色譜法(GC)氣相色譜儀在石油化工、生物化學、醫藥、衛生、食品、環保等方面應用廣泛主要用于唄分析對象的定量和定性分析。
應用石油加工:石油化工,石油地質,油品組成等分析控制和控礦研究;生物化學:臨床應用,病理和毒理研究;中西藥物:原料中間體及成品分析;食品發酵:微生物飲料中微量組分的分析研究;有機化學:有機合成領域內的成份研究和生產控制;
衛生檢查:勞動保護公害檢測的分析和研究;環境保護:大氣水源等污染地的痕量毒物分析、監測和研究尖端科學:軍事檢測控制和研究;運用其進行化學分析的目的:1.要確定被分析物是什么性質,即給物質定性2.要確定被分析物中每個組份的含量的大小,即給物質。
定量。色譜法起源
色譜法起源于20世紀初,1906年俄國植物學家米哈伊爾·茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管,以石油醚洗脫植物色素的提取液,經過一段時間洗脫之后,植物色素在碳酸鈣柱中實現分離,由一條色帶分散為數條平行的色帶由于這一實驗將混合的植物色素分離為不同的色帶,因此茨維特將這種方法命名色譜法。
色譜法原理 溶于流動相中的各組分經過固定相時,由于與固定相發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出,然后利用檢測器依次檢測已分離出來的組分。
☆氣相色譜儀流動相是一種與樣品和固定相都不發生反應的氣體,一般為氮或氫氣 待分析的樣品在色譜柱頂端注入流動相,流動相帶著樣品進入色譜柱,故流動相又稱為載氣載氣在分析過程中是連續地以一定流速流過色譜柱的;而樣品則只是一次一次地注入,每注入一次得到一次分析結果。
樣品在色譜柱中得以分離是基于熱力學性質的差異固定相與樣品中的各組分具有不同的親合力(對氣固色譜儀是吸附力不同,對氣液分配色譜儀是溶解度不同)當載氣帶著樣品連續地通過色譜柱時,親合力大的組分在色譜柱中移動速度慢,因為親合力大意味著固定相拉住它的力量大。
親合力小的則移動快☆檢測器對每個組分所給出的信號,在記錄儀上表現為一個個的峰,稱為色譜峰色譜峰上的極大值是定性分析的依據,而色譜峰所包羅的面積則取決于對應組分的含量,故峰面積是定量分析的依據一個混合物樣品注入后,由記錄儀記錄得到的曲線,稱為色譜圖。
分析色譜圖就可以得到定性分析和定量分析結果色譜儀分類
按固定相的幾何形式分為:1、柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細管內壁上做成色譜柱,試樣從柱頭到柱尾沿一個方向移動而進行分離的色譜法 2、紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體,把試樣點在濾紙上,然后用溶劑展開,各組分在濾紙的不同位置以斑點形式顯現,根據濾紙上斑點位置及大小進行定性和定量分析。
3、薄層色譜法薄層色譜法是將適當粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層,然后用與紙色譜法類似的方法操作以達到分離目的按分離原理分為:1、吸附色譜法:利用吸附劑表面對不同組分物理吸附性能的差別而使之分離的色譜法稱為吸附色譜法。
適于分離不同種類的化合物(例如,分離醇類與芳香烴)2、分配色譜法:利用固定液對不同組分分配性能的差別而使之分離的色譜法稱為分配色譜法3、離子交換色譜法:利用離子交換原理和液相色譜技術的結合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法,利用被分離組分與固定相之間發生離子交換的能力差異來實現分離。
離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物它不僅廣泛地應用于無機離子的分離,而且廣泛地應用于有機和生物物質,如氨基酸、核酸、蛋白質等的分離4、尺寸排阻色譜法:是按分子大小順序進行分離的一種色譜方法,體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻,較早的淋洗出來;中等體積的分子部分滲透;小分子可完全滲透入內,最后洗出色譜柱。
這樣,樣品分子基本按其分子大小先后排阻,從柱中流出被廣泛應用于大分子分級,即用來分析大分子物質相對分子質量的分布5、親和色譜法:相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相不同程度的親和性,使成分與雜質分離的色譜法。
例如利用酶與基質(或抑制劑)、抗原與抗體,激素與受體、外源凝集素與多糖類及核酸的堿基對等之間的專一的相互作用,使相互作用物質之一方與不溶性擔體形成共價結合化合物,用來作為層析用固定相,將另一方從復雜的混合物中選擇可逆地截獲,達到純化的目的。
可用于分離活體高分子物質、過濾性病毒及細胞氣相色譜儀結構主要包括五大系統:載氣系統、進樣系統、分離系統、檢測系統和記錄系統。基本流程如下:
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